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液体样本中活性氧 (ROS) 的检测
人阅读 发布时间:2020-08-05 16:33
活性氧 (Reactive oxygen species, ROS) 包括过氧化氢(H2O2,Hydrogen peroxide)、羟基自由基(•OH,Hydroxyl radical)、单线态氧(1O2,Singlet oxygen)、超氧阴离子 (•O2-,Superoxide anion)、过氧化自由基 (ROO• ,Peroxyl radical)、过氧羟自由基(HOO• ,hydroperoxyl)及其下游产物过氧化物过氧亚硝基阴离子(ONOO-,Peroxynitrite anion)、ClO- 和羟化物等,参与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程。
活性氧 (reactive oxygen species,ROS) 的产生主要是氧化磷酸化的结果,在呼吸链中,在某些位点会有「泄露」的电子直接和氧气或和其他电子受体反应,在酶或非酶作用下引发一系列反应生成不同种类的活性氧:「泄露」的电子最初和氧气反应生成超氧阴离子自由基 (O2-)。超氧阴离子遇水生成 H2O2,同时过氧化氢也可由氧气在单胺氧化酶 (monoamine oxidase, MAO) 的作用下生成,生成的过氧化氢在髓过氧化物酶 (myeloperoxidase, MPO) 的催化下与 Cl- 反应可生成 ClO-,在铁或铜离子的催化下发生 Fenton 反应生成 OH·,超氧阴离子遇氮氧化物反应生成 ONOO-。这些生成的高氧化活性的物质统称为活性氧。
液体样本活性氧(ROS)检测试剂盒是一种利用新型荧光探针 BBoxiProbe® O11 进行液体样本中活性氧(ROS)检测的试剂盒。本试剂盒中的 BBoxiProbe® O11 活性氧(ROS)探针为绿色荧光的活性氧探针,具有 488 / 516nm 的最大激发 / 发射波长。
该探针在液体样本中活性氧(ROS)存在的条件下,被氧化生成绿色荧光物质,绿色荧光强度与液体样本内活性氧(ROS)水平成正比,检测 O11 产物的荧光就可以知道液体样本内活性氧(ROS)的水平。
除了绿色荧光探针,还可以根据实验的需求选择红色荧光的活性氧检测探针。
在激发波长 488 nm,发射波长 516 nm 附近,使用荧光分光光度计、荧光酶标仪、等检测 O11 产物荧光,从而测定液体样本内活性氧(ROS)水平。