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技术资料/正文
细胞外酸化率的计算（ECAR公式）
987 人阅读发布时间：2024-06-26 15:24
细胞外酸化率检测试剂盒
BBcellProbe® Extracellular Acidification Rate（ECAR）Assay Kit
2. 按下表设定空白孔、对照孔和待测样品孔。
计算公式：
ECAR= （F测定2-F测定1）- （F空白2-F空白1）
T2-T1
BBcellProbe® Extracellular Acidification Rate（ECAR）Assay Kit
1.检测工作液试剂配制：
根据待测样本数量，用试剂B检测缓冲液100倍稀释探针P61（母液）（例如：每100 μL P61探针中加入9900 μL检测缓冲液），充分混匀，配制成P61探针检测工作液，备用。2. 按下表设定空白孔、对照孔和待测样品孔。
| 空白孔 | 对照孔 | 待测样品 | |
| 细胞 | 有细胞 | 有细胞 | 有细胞 |
| 检测工作液（μL） | --- | 100 | 100 |
| 试剂B（μL） | 100 | --- | --- |
| 药物（μL）* | --- | --- | 10* |
| 溶剂（药物的溶剂）* | 10* | 10* | --- |
| 氧气封闭液（μL） | 100 | 100 | 100 |
- 准备细胞模型。
- 去除第二次洗涤的检测缓冲液，加入100 μL检测工作液（已含BBcellProbe® P61酸化荧光探针）。
- （可选，如果需要的话）可以在此处添加待测试化合物药物（通常为1-10 μL，以实际为准）。
- 然后用该细胞板进行荧光细胞外酸化变化情况检测。用荧光读板设备读取该细胞板的荧光数据。
- 按照荧光值（F）纵坐标与时间（min）横坐标绘制酸化率曲线。选择线性部分，按照线性部分的斜率对比细胞的ECAR大小。
计算公式：
ECAR= （F测定2-F测定1）- （F空白2-F空白1）
T2-T1