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细胞内活性氧 ROS 的检测
10317 人阅读发布时间：2018-11-15 10:30
活性氧 ( Reactive oxygen species, ROS ) 包括过氧化氢( H2O2，Hydrogen peroxide ）、羟基自由基（•OH，Hydroxyl radical）、单线态氧（1O2，Singlet oxygen）、超氧阴离子 ( •O2-，Superoxide anion )、过氧化自由基 ( ROO• ，Peroxyl radical )、过氧羟自由基（HOO• ，hydroperoxyl）及其下游产物过氧化物过氧亚硝基阴离子（ONOO-，Peroxynitrite anion）、ClO-和羟化物等，参与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程。
活性氧 ( reactive oxygen species,ROS) 的产生主要是氧化磷酸化的结果，在呼吸链中，在某些位点会有 “泄露” 的电子直接和氧气或和其他电子受体反应，在酶或非酶作用下引发一系列反应生成不同种类的活性氧：“泄露” 的电子最初和氧气反应生成超氧阴离子自由基 ( O2·- ) ( 图 1A )。超氧阴离子遇水生成 H2O2 ( 图 1B )，同时过氧化氢也可由氧气在单胺氧化酶 ( monoamine oxidase, MAO ) 的作用下生成 ( 图 1C )，生成的过氧化氢在髓过氧化物酶 ( myeloperoxidase, MPO ) 的催化下与 Cl-反应可生成 ClO-( 图 1D )，在铁或铜离子的催化下发生 Fenton 反应生成 OH· ( 图 1E )，超氧阴离子遇氮氧化物反应生成 ONOO-( 图 1F )。这些生成的高氧化活性的物质统称为活性氧。
贝博 TM BBcellProbeTM 活性氧检测试剂盒 BB-4705 是一种利用荧光探针 DCFH-DA 进行活性氧检测的试剂盒。DCFH-DA 本身没有荧光，可以自由穿过细胞膜，进入细胞内后，可以被细胞内的酯酶水解生成 DCFH。而 DCFH 不能通透细胞膜，从而使探针很容易被标记到细胞内。在活性氧存在的条件下，DCFH 被氧化生成荧光物质 DCF，绿色荧光强度与细胞内活性氧水平成正比，检测 DCF 的荧光就可以知道细胞内活性氧的水平。
在激发波长 502 nm，发射波长 530 nm 附近，使用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、荧光分光光度计、荧光酶标仪、流式细胞仪等检测 DCF 荧光，从而测定细胞内活性氧水平。
本试剂盒可以用于各种真核培养细胞的检测。本试剂盒提供了活性氧阳性对照试剂，以便于活性氧的检测。
