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活细胞及死细胞的染色
10635 人阅读发布时间：2025-03-05 10:53
Calcein-AM 是一种可对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂，Calcein-AM 由于在 Calcein 的基础上加强了疏水性，因此能够轻易穿透活细胞膜。当其进入到细胞质后，酯酶会将其水解为 Calcein 留在细胞内，发出强绿色荧光。与其它同类试剂（如 BCECF-AM 和 Carboxy-fluorescein diacetate）相比，Calcein-AM 是最适合作为荧光探针去染活细胞的，因为它的细胞毒性很低，而且不会抑制任何的细胞功能，如增殖和淋巴球的趋化性。Calcein 的激发和发射波长分别为 490 nm 和 515 nm。Calcein -AM 仅对活细胞染色。
作为核染色染料的 PI 不能穿过活细胞的细胞膜，它穿过死细胞膜的无序区域而到达细胞核，并嵌入细胞的 DNA 双螺旋从而产生红色荧光 (激发：488，545nm，发射：617 nm)，因此 PI 仅对死细胞染色。
由于 Calcein-DNA 和 PI-DNA 都可被 490 nm 激发，因此可用荧光显微镜同时观察活细胞和死细胞。用 545 nm 激发，仅可观察到死细胞。根据以上特点，Calcein, AM 和 PI 经常被结合用来作为活细胞和死细胞的双重染色。
贝博® BBcellProbe® 活细胞 / 死细胞染色试剂盒是采用 Calcein-AM/PI 双染细胞的方法染色活细胞和死细胞。
Calcein AM 和 PI 荧光光谱
