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超氧阴离子的检测方法
人阅读 发布时间：2019-06-21 09:59
活性氧 (Reactive oxygen species, ROS) 包括过氧化氢（H2O2，Hydrogen peroxide）、羟基自由基（•OH，Hydroxyl radical）、单线态氧（1O2，Singlet oxygen）、超氧阴离子 (•O2-，Superoxide anion)、过氧化自由基 (ROO• ，Peroxyl radical)、过氧羟自由基（HOO• ，hydroperoxyl）及其下游产物过氧化物过氧亚硝基阴离子（ONOO-，Peroxynitrite anion）、ClO-和羟化物等，参与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程。
活性氧 (reactive oxygen species,ROS) 的产生主要是氧化磷酸化的结果，在呼吸链中，在某些位点会有 “泄露” 的电子直接和氧气或和其他电子受体反应，在酶或非酶作用下引发一系列反应生成不同种类的活性氧：“泄露” 的电子最初和氧气反应生成超氧阴离子自由基 (O2•-)。超氧阴离子遇水生成 H2O2，同时过氧化氢也可由氧气在单胺氧化酶 (monoamine oxidase,MAO) 的作用下生成 ，生成的过氧化氢在髓过氧化物酶 (myeloperoxidase, MPO) 的催化下与 Cl-反应可生成 ClO-)，在铁或铜离子的催化下发生 Fenton 反应生成 OH•，超氧阴离子遇氮氧化物反应生成 ONOO-。这些生成的高氧化活性的物质统称为活性氧。
贝博® BBoxiProbe® 超氧阴离子（O2•-）检测试剂盒是一种利用超氧阴离子特异性荧光探针 BBoxiProbe® O88 进行超氧阴离子检测的试剂盒。BBoxiProbe® O88 可自由透过活细胞膜进入细胞内，并被细胞内的超氧阴离子（O2•-）氧化，产生红色荧光产物。根据活细胞中红色荧光的产生，可以判断细胞 O2•-含量的多少和变化。用流式细胞仪或荧光显微镜可直接观察，是一种快速简便的组织或培养活细胞中超氧阴离子检测方法。
在激发波长 518nm，发射波长 606 nm 附近，使用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、荧光分光光度计、荧光酶标仪、流式细胞仪等检测荧光，从而测定细胞内超氧阴离子（O2•-）水平。
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