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细胞外酸化率（ECAR）的检测
人阅读 发布时间：2022-12-05 14:41
细胞外酸化（Extracellular Acidification ；ECA）测量可以为糖酵解（glycolytic）活性研究提供丰富的信息，细胞外酸化率（ECAR）的检测可用于代谢表征并确定具体的干预措施（如养分缺失、缺氧、药物治疗或遗传基因操控）如何影响糖酵解通量。
细胞代谢与癌症、心血管疾病、神经退行性疾病、肥胖、糖尿病及干细胞等多个领域息息相关。糖酵解是真核细胞中的关键代谢途径，在分化、增殖和 ATP 生成等生理过程中起重要作用。糖酵解的改变对多种疾病也具有重要意义，包括但不限于癌症、心血管疾病和代谢疾病。
能量代谢指标胞外酸化率（ECAR）可帮助研究人员更多地了解细胞对外界的应激反应和运作机制。但以往细胞代谢的检测技术存在较多限制，例如难以对细胞代谢进行连续、实时的检测；一些专门检测细胞代谢的仪器、硬件贵，试剂耗材消耗成本高，实验重复性低且只能检测有限指标。
与传统的终点糖酵解分析不同， 该糖酵解分析可以实时测定细胞外酸化率 (ECAR)，可以观察糖酵解机制的短暂变化和快速反应。样品不需要密封处理，在这些条件下， ECAR 是一种可靠且稳定的糖酵解活性测定方法。
细胞外酸化率（ECAR）检测试剂盒（Extracellular acidification Rate Assay Kit）是利用合成的酸化检测荧光探针 BBcellProbe® P61 来检测细胞外酸化情况变化的试剂盒。可以通过简单的混合基于荧光酶标仪便捷的直接进行细胞外酸化情况的动态实时测定。可以实时测量细胞糖酵解活性，是以高通量形式来评估用于代谢表征的细胞呼吸以及评估治疗对细胞功能毒性作用的一种可靠方法。
它可以使用荧光酶标仪在标准微孔板上进行简单动力学测定。随着糖酵解作用的进行，丙酮酸转化为乳酸，这将导致细胞外环境 pH 降低。P61 探针可以灵敏地检测到 pH 降低，并表现为 P61 探针荧光信号增加，从而实现对 ECAR 的测定。
P61 最大激发波长为 488nm，最大发射波长为 580nm。其荧光在碱性条件下强度较弱，反之酸性条件下变强，从而 P61 可被用于监测细胞外酸化的变化。在测定中，细胞外酸化率由荧光信号随时间的变化计算。细胞外酸化增加，荧光信号的变化率增加；反之，酸化减少，荧光信号的变化率降低。
P61 与乳酸的这种反应是非破坏性且完全可逆的 P61 没有细胞毒性，其是化学稳定的，惰性的，水溶性的和细胞不渗透的，不能透过完整的细胞膜。因此还可以同时与细胞耗氧率， 线粒体膜电位， ROS 和细胞 ATP 、LDH 等检测的试剂结合使用，进行多参数检测。
细胞酸化检测试剂盒可以用于直接，实时分析细胞外酸化情况。本试剂盒可以用来测量各种全细胞（贴壁和悬浮细胞），各种 3D 培养物，组织，小生物，球体，支架和基质等。
细胞代谢与癌症、心血管疾病、神经退行性疾病、肥胖、糖尿病及干细胞等多个领域息息相关。糖酵解是真核细胞中的关键代谢途径，在分化、增殖和 ATP 生成等生理过程中起重要作用。糖酵解的改变对多种疾病也具有重要意义，包括但不限于癌症、心血管疾病和代谢疾病。
能量代谢指标胞外酸化率（ECAR）可帮助研究人员更多地了解细胞对外界的应激反应和运作机制。但以往细胞代谢的检测技术存在较多限制，例如难以对细胞代谢进行连续、实时的检测；一些专门检测细胞代谢的仪器、硬件贵，试剂耗材消耗成本高，实验重复性低且只能检测有限指标。
与传统的终点糖酵解分析不同， 该糖酵解分析可以实时测定细胞外酸化率 (ECAR)，可以观察糖酵解机制的短暂变化和快速反应。样品不需要密封处理，在这些条件下， ECAR 是一种可靠且稳定的糖酵解活性测定方法。
细胞外酸化率（ECAR）检测试剂盒（Extracellular acidification Rate Assay Kit）是利用合成的酸化检测荧光探针 BBcellProbe® P61 来检测细胞外酸化情况变化的试剂盒。可以通过简单的混合基于荧光酶标仪便捷的直接进行细胞外酸化情况的动态实时测定。可以实时测量细胞糖酵解活性，是以高通量形式来评估用于代谢表征的细胞呼吸以及评估治疗对细胞功能毒性作用的一种可靠方法。
它可以使用荧光酶标仪在标准微孔板上进行简单动力学测定。随着糖酵解作用的进行，丙酮酸转化为乳酸，这将导致细胞外环境 pH 降低。P61 探针可以灵敏地检测到 pH 降低，并表现为 P61 探针荧光信号增加，从而实现对 ECAR 的测定。
P61 最大激发波长为 488nm，最大发射波长为 580nm。其荧光在碱性条件下强度较弱，反之酸性条件下变强，从而 P61 可被用于监测细胞外酸化的变化。在测定中，细胞外酸化率由荧光信号随时间的变化计算。细胞外酸化增加，荧光信号的变化率增加；反之，酸化减少，荧光信号的变化率降低。
P61 与乳酸的这种反应是非破坏性且完全可逆的 P61 没有细胞毒性，其是化学稳定的，惰性的，水溶性的和细胞不渗透的，不能透过完整的细胞膜。因此还可以同时与细胞耗氧率， 线粒体膜电位， ROS 和细胞 ATP 、LDH 等检测的试剂结合使用，进行多参数检测。
细胞酸化检测试剂盒可以用于直接，实时分析细胞外酸化情况。本试剂盒可以用来测量各种全细胞（贴壁和悬浮细胞），各种 3D 培养物，组织，小生物，球体，支架和基质等。
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