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细菌样本中 过氧亚硝基阴离子(ONOO-) 的检测

人阅读 发布时间:2022-12-05 14:38

   活性氧 (reactive oxygen species,ROS) 的产生主要是氧化磷酸化的结果在呼吸链中在某些位点会有「泄露」的电子直接和氧气或和其他电子受体反应在酶或非酶作用下引发一系列反应生成不同种类的活性氧「泄露」的电子最初和氧气反应生成超氧阴离子自由基 (O2·-)。超氧阴离子遇水生成 H2O2,同时过氧化氢也可由氧气在单胺氧化酶  (monoamine oxidase,MAO)  的作用下生成,生成的过氧化氢在髓过氧化物酶 (myeloperoxidase,MPO) 的催化下与 Cl-反应可生成 ClO-,在铁或铜离子的催化下发生 Fenton 反应生成 OH·,超氧阴离子遇氮氧化物反应生成 ONOO-。这些生成的高氧化活性的物质统称为活性氧。
       过氧亚硝基阴离子(ONOO-Peroxynitrite anion)是活性氧家族的一员,活性氧 (Reactive oxygen species, ROS) 包括过氧化氢(H2O2Hydrogen peroxide)、羟基自由基(•OHHydroxyl radical)、单线态氧(1O2Singlet oxygen)、一氧化氮(NONitric oxide)、超氧阴离子 (•O2-Superoxide anion)、过氧化自由基 (ROO• Peroxyl radical)、过氧羟自由基(HOO• hydroperoxyl)及其下游产物过氧化物过氧亚硝基阴离子(ONOO-Peroxynitrite anion)、ClO- 和羟化物等,参与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程。
       O56 过氧亚硝基阴离子(ONOO-)探针作为一种新型荧光探针,作用于用于细菌样本(革兰氏阴性菌和阳性菌都适用)。在细菌中过氧亚硝基阴离子(ONOO-)存在的条件下,探针进入细菌,被氧化生成绿色荧光物质,绿色荧光强度与细菌内过氧亚硝基阴离子(ONOO-)水平成正比,检测 O56 产物的荧光就可以知道细菌内过氧亚硝基阴离子(ONOO-)的水平。O56 在激发波长 488nm,发射波长 526 nm 附近,使用荧光分光光度计、荧光酶标仪、荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪等可以检测荧光强度的设备,可以方便测定荧光情况,从而测定细菌胞内活性氧水平。

 

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