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细菌样本中 过氧亚硝基阴离子(ONOO-) 的检测
人阅读 发布时间:2022-12-05 14:38
活性氧 (reactive oxygen species,ROS) 的产生主要是氧化磷酸化的结果,在呼吸链中,在某些位点会有「泄露」的电子直接和氧气或和其他电子受体反应,在酶或非酶作用下引发一系列反应生成不同种类的活性氧:「泄露」的电子最初和氧气反应生成超氧阴离子自由基 (O2·-)。超氧阴离子遇水生成 H2O2,同时过氧化氢也可由氧气在单胺氧化酶 (monoamine oxidase,MAO) 的作用下生成,生成的过氧化氢在髓过氧化物酶 (myeloperoxidase,MPO) 的催化下与 Cl-反应可生成 ClO-,在铁或铜离子的催化下发生 Fenton 反应生成 OH·,超氧阴离子遇氮氧化物反应生成 ONOO-。这些生成的高氧化活性的物质统称为活性氧。
过氧亚硝基阴离子(ONOO-,Peroxynitrite anion)是活性氧家族的一员,活性氧 (Reactive oxygen species, ROS) 包括过氧化氢(H2O2,Hydrogen peroxide)、羟基自由基(•OH,Hydroxyl radical)、单线态氧(1O2,Singlet oxygen)、一氧化氮(NO,Nitric oxide)、超氧阴离子 (•O2-,Superoxide anion)、过氧化自由基 (ROO• ,Peroxyl radical)、过氧羟自由基(HOO• ,hydroperoxyl)及其下游产物过氧化物过氧亚硝基阴离子(ONOO-,Peroxynitrite anion)、ClO- 和羟化物等,参与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程。
O56 过氧亚硝基阴离子(ONOO-)探针作为一种新型荧光探针,作用于用于细菌样本(革兰氏阴性菌和阳性菌都适用)。在细菌中过氧亚硝基阴离子(ONOO-)存在的条件下,探针进入细菌,被氧化生成绿色荧光物质,绿色荧光强度与细菌内过氧亚硝基阴离子(ONOO-)水平成正比,检测 O56 产物的荧光就可以知道细菌内过氧亚硝基阴离子(ONOO-)的水平。O56 在激发波长 488nm,发射波长 526 nm 附近,使用荧光分光光度计、荧光酶标仪、荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪等可以检测荧光强度的设备,可以方便测定荧光情况,从而测定细菌胞内活性氧水平。
过氧亚硝基阴离子(ONOO-,Peroxynitrite anion)是活性氧家族的一员,活性氧 (Reactive oxygen species, ROS) 包括过氧化氢(H2O2,Hydrogen peroxide)、羟基自由基(•OH,Hydroxyl radical)、单线态氧(1O2,Singlet oxygen)、一氧化氮(NO,Nitric oxide)、超氧阴离子 (•O2-,Superoxide anion)、过氧化自由基 (ROO• ,Peroxyl radical)、过氧羟自由基(HOO• ,hydroperoxyl)及其下游产物过氧化物过氧亚硝基阴离子(ONOO-,Peroxynitrite anion)、ClO- 和羟化物等,参与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程。
O56 过氧亚硝基阴离子(ONOO-)探针作为一种新型荧光探针,作用于用于细菌样本(革兰氏阴性菌和阳性菌都适用)。在细菌中过氧亚硝基阴离子(ONOO-)存在的条件下,探针进入细菌,被氧化生成绿色荧光物质,绿色荧光强度与细菌内过氧亚硝基阴离子(ONOO-)水平成正比,检测 O56 产物的荧光就可以知道细菌内过氧亚硝基阴离子(ONOO-)的水平。O56 在激发波长 488nm,发射波长 526 nm 附近,使用荧光分光光度计、荧光酶标仪、荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪等可以检测荧光强度的设备,可以方便测定荧光情况,从而测定细菌胞内活性氧水平。