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线粒体超氧化物染色Mitochondrial Superoxide Staining
144 人阅读发布时间：2025-03-10 15:31
贝博® BBcellProbe® M23线粒体超氧化物染色探针（BB-441153）是一种细胞渗透型的对活细胞中的线粒体体进行选择性染色的一类新型荧光染料，该探针可以选择性标记线粒体，包含标记线粒体的弱巯基反应性的氯甲基官能团。只需简单孵育细胞，即可穿过细胞膜并直接聚集在活性线粒体上。一旦进入线粒体后，快速被超氧化物氧化，并产生绿色荧光。BBcellProbe® M23线粒体超氧化物染色探针只可被超氧化物氧化，而不被其他活性氧类(ROS)和活性氮类(RNS)氧化。氧化产物结合核酸后，可产生大量绿色荧光。
按每个样用100 ul染料计，试剂盒可以做30-150个样或60-300个样。
贝博® BBcellProbe® 系列线粒体探针具有多种颜色可以选择，可根据情况对样品进行多色标记实验。除了本试剂盒的绿色荧光探针，贝博还可以提供红色、蓝色、橙色等颜色的染色试剂盒。
检测方法：荧光显微镜 / 激光共聚焦
样本类型：悬浮细胞 / 贴壁细胞
大包装试剂盒（BB-441153-60T）的探针管中加入20 μl无水DMF，充分溶解。
1）培养皿/培养板准备细胞样本。
2）待细胞生长到合适丰度，吸除培养液，加入适量37℃预热的含探针工作液。于生长状态下避光孵育30分钟～60分钟（具体孵育时间需根据细胞类型而定，需预实验优化）。
3）利用新鲜培养基替换上述染色液。
4）荧光显微镜（含合适滤片）或激光共聚焦显微镜、荧光酶标仪下观察。最大激发/发射波长为488 / 510 nm。
2.2 对于悬浮细胞
1）离心，吸除上清。
2）利用37℃预热的探针工作液重悬细胞，于生长状态下避光孵育30分钟～60分钟（具体时间需根据细胞类型而定，需预实验优化）。
3）离心，吸除染色液，加入新鲜培养液重悬细胞。
4）置于荧光镜下观察。或流式细胞仪、荧光酶标仪检测。最大激发/发射波长为510 / 580nm。
按每个样用100 ul染料计，试剂盒可以做30-150个样或60-300个样。
贝博® BBcellProbe® 系列线粒体探针具有多种颜色可以选择，可根据情况对样品进行多色标记实验。除了本试剂盒的绿色荧光探针，贝博还可以提供红色、蓝色、橙色等颜色的染色试剂盒。
检测方法：荧光显微镜 / 激光共聚焦
样本类型：悬浮细胞 / 贴壁细胞
- 染色母液配制：
大包装试剂盒（BB-441153-60T）的探针管中加入20 μl无水DMF，充分溶解。
- 染色工作液配制：
- 细胞染色
1）培养皿/培养板准备细胞样本。
2）待细胞生长到合适丰度，吸除培养液，加入适量37℃预热的含探针工作液。于生长状态下避光孵育30分钟～60分钟（具体孵育时间需根据细胞类型而定，需预实验优化）。
3）利用新鲜培养基替换上述染色液。
4）荧光显微镜（含合适滤片）或激光共聚焦显微镜、荧光酶标仪下观察。最大激发/发射波长为488 / 510 nm。
2.2 对于悬浮细胞
1）离心，吸除上清。
2）利用37℃预热的探针工作液重悬细胞，于生长状态下避光孵育30分钟～60分钟（具体时间需根据细胞类型而定，需预实验优化）。
3）离心，吸除染色液，加入新鲜培养液重悬细胞。
4）置于荧光镜下观察。或流式细胞仪、荧光酶标仪检测。最大激发/发射波长为510 / 580nm。