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DiI细胞膜染色试剂
146 人阅读发布时间：2025-03-10 16:02
贝博® BBcellProbe® 细胞膜染色试剂DiI（BB-441916）是橙色荧光标记的细胞膜探针，具有549 nm / 565 nm的最大激发/发射波长。
DiI通过与膜结构的脂质分子结合而标记细胞，适合监测细胞运动以及细胞定位分析。因具有良好的染料维持性，其有着强而稳定的橙红色荧光（Ex/Em=549 / 565 nm），与绿色荧光染料以及蛋白具有良好的荧光分辨性，适合做多重指标染色。
当亲脂性的荧光探针DiI进入细胞膜后，在整个细胞膜上扩散，最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。染色液DiI在进入细胞膜之前荧光非常弱，当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强，被激发后可以发出橙色的荧光，具有很高的淬灭常数和激发态寿命。
荧光探针DiI通常不会明显影响细胞的活力，因此被广泛用于正向或逆向的，活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂或长期示踪剂（long-term tracer）。除了最简单的细胞膜荧光标记外，还可以用于检测细胞的融合和粘附，检测发育或移植过程中细胞迁移，通过FRAP（Fluorescence Recovery After Photobleaching）检测脂在细胞膜上的扩散，检测细胞毒性和标记脂蛋白等。
工作浓度下，此染料无细胞毒性，不会影响细胞活力以及增殖能力。
检测方法：
样本类型：悬浮细胞/贴壁细胞
贴壁细胞染色
用荧光显微镜或流式细胞仪检测 激发波长为549 nm，最大发射波长为565 nm。
DiI通过与膜结构的脂质分子结合而标记细胞，适合监测细胞运动以及细胞定位分析。因具有良好的染料维持性，其有着强而稳定的橙红色荧光（Ex/Em=549 / 565 nm），与绿色荧光染料以及蛋白具有良好的荧光分辨性，适合做多重指标染色。
当亲脂性的荧光探针DiI进入细胞膜后，在整个细胞膜上扩散，最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。染色液DiI在进入细胞膜之前荧光非常弱，当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强，被激发后可以发出橙色的荧光，具有很高的淬灭常数和激发态寿命。
荧光探针DiI通常不会明显影响细胞的活力，因此被广泛用于正向或逆向的，活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂或长期示踪剂（long-term tracer）。除了最简单的细胞膜荧光标记外，还可以用于检测细胞的融合和粘附，检测发育或移植过程中细胞迁移，通过FRAP（Fluorescence Recovery After Photobleaching）检测脂在细胞膜上的扩散，检测细胞毒性和标记脂蛋白等。
工作浓度下，此染料无细胞毒性，不会影响细胞活力以及增殖能力。
检测方法：
激光共聚焦/荧光显微镜/流式细胞仪
样本类型：悬浮细胞/贴壁细胞
染色工作液的配制：
根据样本数量，用HBSS或相应的无血清培养基或其他缓冲液将探针DiI进行500-2500倍稀释，配制成染色工作液。细胞染色
悬浮细胞染色
- 用PBS洗涤细胞2次。
- 加入适量体积的染色工作液重悬细胞。
- 在37 ℃孵育细胞，不同的细胞最佳培养时间不同。可以用20分钟作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的标记结果
- 孵育结束，离心5分钟。
- 倾倒上清液，再次缓慢加入37℃预热的培养基重悬细胞。
- 重复（4），（5）步骤两次以上
贴壁细胞染色
- 用PBS洗涤细胞2次。
- 细胞培养板中或细胞爬片上加入适量体积的染色工作液。
- 37 ℃孵育细胞，不同的细胞最佳培养时间不同。可以用20分钟作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的标记结果。
- 吸干染色工作液，用培养液洗培养板或盖玻片，每次用预热的培养基覆盖所有细胞，孵育，然后吸干培养基。用荧光显微镜或流式细胞仪检测
用荧光显微镜或流式细胞仪检测 激发波长为549 nm，最大发射波长为565 nm。